Наименование прикладного биомедицинского  исследования: Разработка научно-обоснованной программы по прогнозированию
и профилактике преэклампсии у беременных
Предмет исследования / Исследуемая медицинская технология, метод, средство: Этиопатогенетические механизмы и прогностические маркеры развития преэклампсии
Сроки проведения исследования: 2013-2015 годы
Заказчик (спонсор): Министерство здравоохранения РК
№ госрегистрации: 0113РК00941
Шифр программы: О.0637
УДК: 618
Организация- исполнитель: Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии
Руководитель исследования: Т.К. Кудайбергенов, Директор Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии, д.м.н., профессор
Список исполнителей: Л.С. Каюпова, А.А. Джумабаева, З.О. Базылбекова, Н.А. Каюпова, Н.М. Мамедалиева, А.Н. Кожахметов, Ж.А. Утешева,Н.В. Кравцова, А.М. Курманова, А.Р. Аимбетова,А.Г. Ракишева, А.В. Азимбаев, Е.С. Тажибаев, К.Р. Жиенбаев, Г.С. Святова, Г.М. Березина
Цель и задачи исследования:

Цель исследования: изучение этиопатогенетических механизмов и прогностических маркеров развития преэклампсии и разработка дифференцированного алгоритма ведения беременности для снижения материнской и перинатальной заболеваемости и смертности в Республике Казахстан.

Задачи исследования:

  1. Установить удельный вес, структуру степени тяжести преэклампсии и влияние артериальной гипертензии, отечно-протеинурического синдрома на характер акушерских и перинатальных исходов
  2. Оценить диагностическую и прогностическую значимость плацентарного фактора роста, рецептора-1 сосудисто-эндотелиального фактора роста в прогнозировании и ранней диагностике преэклампсии на основе биохимического скрининга беременных
  3. Исследовать маркеры дисфункции эндотелия при беременности, осложненной развитием преэклампсии, при неосложненной преэклампсией беременности и при физиологическим течении гестации
  4. Определить характер изменений гормонального статуса и окислительно-восстановительных процессов у беременных с преэклампсией.
  5. Изучить спектрометрические показатели проб сыворотки крови при преэклампсии, при неосложненном преэклампсией течении беременности и при физиологической беременности
  6. Определить генетический вклад и иммунологическую компетентность в этиопатогенез и клинико-диагностическую значимость полиморфизмов генов фолатного обмена (MTHFR, MTRR, MTR), свертывающей системы крови (FV, FII; PLANC-1), липидного обмена (ApoE, ApoC), альдостерон-ренин-ангиотензиновой системы (АСЕ, AGTR, CYP11B2), генов эндотелиальной дисфункции (eNOS3, EDNRA, ppEDN1, TGF-β1) в развитие преэклампсии
  7. Выявить факторы риска развития гестозов беременности, разработать молекулярно-генетические, иммунологические алгоритмы прогнозирования и научно-обоснованные меры профилактики для улучшения репродуктивного здоровья населения Республики Казахстан.
Резюме результатов исследования:

Научная новизна: Установлена значимость параметров эндотелиальных факторов роста и цитокинов, приводящих к нарушению инвазии трофобласта и влияющих на компенсаторно-приспособительные механизмы при беременности. Установлена значимость изменений эндотелиальной функции сосудов, приводящих к генерализованному вазоспазму и нарушению микроциркуляции в системе «мать-плацента-плод», а также нарушений ферментно-метаболической функции в организме.

Впервые разработаны новые прогностические критерии развития преэклампсии по уровням эндотелиальных факторов роста (плацентарного фактора роста, сосудисто-эндотелиального фактора роста), цитокинов (фактор некроза опухоли – α, интерферон – γ), маркеров дисфункции эндотелия (эндотелин, оксид азота, количество циркулирующих эндотелиоцитов), влияющих на процесс инвазии цитотрофобласта и ремоделирование спиральных артерий матки.

Впервые обоснованы иммунологические способы диагностики и прогнозирования осложненной гестозом беременности путем исследования маркеров ранней и поздней активации, дифференцировки и функциональной зрелости иммунокомпетентных клеток крови.

Впервые изучены популяционные особенности, распределение частот аллелей и генотипов полиморфных вариантов генов предрасположенности к гестозам беременности (преэклампсия) фолатного обмена (MTHFR, MTRR, MTR), свертывающей системы крови (FV, FII; PLANC-1), альдостерон-ренин-ангиотензиновой системы (АСЕ, AGTR), генов эндотелиальной дисфункции (eNOS3), липидного обмена (аполипопротеины) (ApoC3, ApoE) в казахской популяции.

Выявленные популяционные особенности распределений частот аллелей и генотипов генов фолатного обмена, свертывающей системы крови, альдостерон-ренин-ангиотензиновой системы, генов эндотелиальной дисфункции и липидного обмена позволят определить генетический вклад в клинико-диагностическую значимость и разработать молекулярно-генетические методы прогнозирования развития гестозов беременности для снижения риска их возникновения.

На основании полученных клинико-лабораторных данных разработан и предложен алгоритм прогноза развития преэклампсии в группах риска, позволяющий прогнозировать развитие преэклампсии с I триместра и предложен метод эффективной профилактики развития преэклампсии

Практическая значимость: В результате проведенных исследований обоснованы способы прогнозирования осложнений беременности, разработаны диагностические и прогностические критерии, позволяющие определить наличие доклинических признаков гестоза, прогнозировать перинатальные исходы, что является обоснованием выбора тактики и сроков родоразрешения для практических врачей.

Проведена разработка алгоритма и внедрение надежных молекулярно-генетических маркеров для ранней диагностики предрасположенности к гестозам беременности (преэклампсия) с целью прогнозирования, эффективной профилактики и назначения этиопатогенетической терапии, что позволит снизить частоту гестозов и даст значимый социально-экономический эффект в улучшении репродуктивного здоровья населения РК.

Создана система молекулярно-генетической диагностики предрасположенности к развитию преэклампсии с целью оптимизации медико-генетического консультирования при данной патологии

Заключение и выводы: Выводы:

  1. Клинико-статистический анализ течения беременности и исхода родов при преэклампсии показал, что наиболее неблагоприятное влияние на частоту и характер перинатальных потерь оказывает артериальная гипертензия, индуцированная беременностью в сочетании с отечно-протеинурическим синдромом, в отличие от хронической артериальной гипертензии (р <0,05).
  2. Максимальный подъем систолического — 164,26±12,05 мм рт. ст. и диастолического — 107,5±7,99 мм рт.ст. артериального давления в группе беременных с ранней ПЭ оказался достоверно выше аналогичных показателей у беременных с поздней формой ПЭ — 157,87±8,09 и 104,83±6,28 мм рт. ст., соответственно (t1=4,33; t2=2,49; P<0.05).
  3. Родоразрешение по тяжести состояния беременной при ранней ПЭ происходит достоверно раньше, средний срок беременности к родам составил 31,44±3,01 недель, в то время как при поздней ПЭ — 37,62±2,32 недель, различия статистически высоко достоверны (t=15,46; P<0.001).
  4. Средний вес ребенка при рождении от беременности, осложненной ранней ПЭ, составил 1617,5±684,7 грамм, при поздней ПЭ этот показатель оказался достоверно выше — 2934,5±578,49 грамм (t=13,66; P<0.001).
  5. Раннее начало и тяжесть клинической картины с более ранним досрочным родоразрешением, приводит к более неблагоприятным исходам родов при ранней ПЭ, что проявилось в HELLP синдроме – 0,98%, судороги – 3,4%, отслойке плаценты – 0,49%; более высоких показателях мертворождаемости, ранней неонатальной и перинатальной смертности.
  6. У беременных с преэклампсией, начиная с I триместра беременности, отмечается нарушение синтеза эндотелиальных факторов роста, выражающееся в снижении продукции плацентарного фактора роста и сосудисто-эндотелиального фактора роста (р<0,001), что ведет к развитию эндотелиальной дисфункции, проявляющееся в повышении уровня эндотелина-1,2, достоверном снижении метаболитов оксида азота (р<0,001) и повышении количества циркулирующих эндотелиоцитов (р<0,001). Выявленная достоверная корреляционная зависимость между содержанием плацентарного фактора роста и инвазией трофобласта (r=0,94), а также между содержанием сосудисто-эндотелиального фактора роста и инвазией трофобласта (r=0,86) обосновывает правомочность использования параметров эндотелиальных факторов роста при прогнозировании развития преэклампсии.
  7. Спектрометрическая характеристика нарушения кластерной структуры воды и повышение содержания активных форм кислорода свидетельствует о повреждении эндотелия сосудов и развитии эндотелиальной дисфункции у беременных с преэклампсией.
  8. Существенная роль в патогенезе развития преэклампсии принадлежит последовательным взаимосвязанным нарушениям в иммунной системе с нарушением продукции цитокинов, заключающееся в увеличении синтеза ThI-цитокинов ФНО-α, ИФН-γ, (р<0,001) при неизмененном уровне ThII-цитокина интерлейкина-4, что вызывает генерализованные нарушения в целостной системе «мать-плацента-плод» с нарушением процессов инвазии трофобласта.
  9. Критериями прогнозирования развития преэклампсии являются: снижение содержания плацентарного фактора роста менее 48,5 пг/мл; снижение содержания сосудисто-эндотелиального фактора роста менее 7,2 пг/мл; повышение содержания эндотелина-1,2 выше 1,45 фмоль/мл; снижение метаболитов оксида азота менее 0,85 мкг/мл; повышение количества циркулирующих в крови эндотелиоцитов более 6,5х104/л.
  10. Предложенная нами система прогнозирования развития преэклампсии, включающая параметры эндотелиальных факторов роста, цитокинов и маркеров дисфункции эндотелия, позволяет прогнозировать развитие преэклампсии с вероятностью до 86,6%.
  11. Проведение комплекса лечебно-профилактических мероприятий, включающего оценку степени риска и параметров прогностических коэффициентов с последующей коррекцией выявленных нарушений позволило снизить частоту развития преэклампсии при применении утрожестана в 4 раза и при применении хофитола в 1,8 раза.
  12. Разработаны количественные и функциональные параметры иммунитета у беременных с риском развития преэклампсии на локальном уровне. Была выявлена разбалансировка количественных показателей иммунитета в материнской части пуповинной крови женщин. Тестирован количественный дефицит СД3+СД19-, СД3-СД19+, СД3+СД4+, СД3+СД8+ лимфоцитов, резкое возрастание количества натуральных киллерных клеток СД3+СД16+, СД3+СД56+ и преобладание процесса апоптоза над процессом пролиферации, в отличии от аналогичных данных контроля.
  13. Функциональное состояние лимфоцитов пуповинной крови беременных с риском развития преэклампсии отличалось от аналогичных данных контроля усилением ранней активации по СД 25+ маркерам среди СД3+СД19-, СД3+СД4+, СД3+СД8+, СД3+СД16+, СД3+СД56+ лимфоцитов, а так же возрастанием готовности этих клеток к апоптозу по СД95+ маркерам.
  14. Изучены популяционные частоты генотипов и аллелей генов фолатного метаболизма (MTHFR, MTRR, MTR), свертывающей системы крови (FV, FII), альдостерон-ренин-ангиотензиновой системы (АСЕ, AGTR1), липидного обмена (ApoЕ и ApoC3), эндотелиальной NO-синтазы (eNOS3) в казахской популяции, что вносит значительный вклад в изучение генофонда казахов и создало молекулярно-генетическую основу для определения их клинико-диагностической значимости в развитии гестозов беременности, в частности преэклампсии.
  15. Проведенный популяционно-генетический анализ клинико-лабораторных параметров 205 беременных с ПЭ показал, что удельный вес поздней ПЭ составил 73,66% от общего числа беременностей, осложненных ПЭ, что оказалось в 2,5 раз чаще ранней формы ПЭ — 26,34%.
  16. Выявлена статистически значимая ассоциация (р<0,002) SNP с развитием ПЭ в казахской популяции по генам фолатного метаболизма MTHFR (rs1801131) с OR — 1,35 и MTR (rs1805087) с OR =2,01; по гену свертывающей системы крови FII (rs1799963) с OR 4,52; генам альдостерон-ренин-ангиотензиновой системы — AGTR1 (rs5186) с OR- 4,22, eNOS3 (rs1799983) с OR- 3,25 и АСЕ (rs4340) с OR — 1,50, генам липидного обмена — ApoC3 (rs5128) с OR –и 1,97.
  17. Определены отклонения от равновесия Харди-Вайнберга по изученным SNP в контрольной группе для rs5128 гена ApoC3 (из-за избытка  гетерозигот),  rs1799983 генаe NOS3 (из-за недостатка гетерозигот) и rs4340 гена ACE(из-за избытка  гетерозигот) (р=0,00001; 0,00002; 0,00001, соответственно); в основной группе для rs1801131 гена  MTHFR,  rs4340 гена  ACE, rs429358 гена АроЕ (р=0,005; 0,006, 0,01, соответственно), что свидетельствует о возможно большем влиянии данных полиморфизмов на развитие биохимических нарушений некоторых звеньев патогенеза развития преэклампсии.

Практические рекомендации:

Для практического здравоохранения предлагаются:

  1. На этапе ведения в женской консультации для прогнозирования развития преэклампсии рекомендуется использование таблицы алгоритма прогнозирования преэклампсии. При общей сумме прогностических коэффициентов 13 баллов и более выносится заключение о высокой степени риска развития преэклампсии.
  2. Наиболее информативными лабораторными критериями прогнозирования развития преэклампсии с I триместра беременности являются:

— содержание плацентарного фактора роста менее 48,5 пг/мл;

— содержание сосудисто-эндотелиального фактора роста менее 7,2 пг/мл;

— уровень ФНО-α выше 3,85 пг/мл;

— содержание ИФН-γ выше 35,65 пг/мл;

— содержание эндотелина-1,2 выше 1,45 фмоль/мл;

— содержание метаболитов оксида азота менее 0,85 мкг/мл;

— количество циркулирующих в крови эндотелиоцитов более 6,5х104/л.

  1. Высокую прогностическую значимость в отношении развития преэклампсии имеет проведение спектроскопического исследования сыворотки крови с целью оценки интенсивности процессов свободнорадикального окисления: при беременности, осложненной развитием преэклампсии, спектральная подпись характеризуется повышением интенсивности поглощения оптического излучения, а спектральная кривая находится гораздо ниже спектральной кривой, характерной для физиологической беременности.
  2. Беременным группы риска развития преэклампсии необходимо проводить комплекс лечебно-профилактических мероприятий, включающий выявление сопутствующей экстрагенитальной патологии и оценку степени риска.

С I триместра беременности после оценки степени риска при сумме прогностических коэффициентов 13 баллов и более в комплекс профилактических мероприятий необходимо включать:

— хофитол по 2 таблетки 3 раза в день в сроках беременности 16-17 недель, 20-24 недели, 28-30 недель и 34-36 недель;

— утрожестан по 100 мг 2 раза в день с 6-7 по 16-17 недели беременности.

Степень внедрения: 48 научных изданий, 14 поданы в печать, 10 докладов на конференциях, 4 постерных доклада
Область применения: Акушерство, неонатология, перинатология, иммунология. медицинская генетика
Ключевые слова: Преэклампсия, маркеры дисфункции эндотелия, гормональноый статус, фенотипический профиль лимфоцитов, спектрометрические показатели, популяционная частота, генотип, аллели, полиморфизм гена
 Материалы для скачивания: Отчет по проведенным исследованиям

 

MEDScience.kz
Translate »

Sharing is Caring

Help spread the word. You're awesome for doing it!